Gankyrin真核表达载体的构建及其在NIH3T3细胞中的表达

• 作者: 丁艳 奚涛 王淑珍 申静 罗学刚
• 来源期刊: 中国药科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Gankyrin 载体构建 转染 NIH3T3细胞
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 172-176
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3689字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5048.2007.02.018

摘要

目的:构建Gankyrin基因的真核表达载体并转染NIH3T3细胞,获得稳定转染Gankyrin的NIH3T3细胞株,研究Gankyrin在真核细胞中的表达及功能.方法:通过RT-PCR方法从肝癌细胞SMMC-7721,中扩增获得人Gankyrin编码区基因,克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP上,利用阳离子脂质体转染NIH3T3细胞,经G418筛选获得稳定表达的细胞克隆.RT-PCR检测Gankyrin转染细胞后的转录;荧光显微镜观察确定Gankyrin在细胞中的定位分布;MTT法测定Gankyrin对细胞生长、血清依赖性及对地塞米松诱导细胞凋亡的敏感性影响.结果:重组表达载体pIRES2-EGFP-Gankyrin构建成功.Gankyrin在NIH3T3细胞中获得了有效转录及表达,并在细胞核和细胞浆中均广泛分布.Gankyrin可以显著促进NIH3T3细胞的增殖,降低血清依赖性并提高对地塞米松致细胞凋亡的耐受能力.结论:建立了稳定表达Gankyrin的NIH3T3细胞株,为进一步研究奠定了理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	奚涛	中国药科大学生命科学与技术学院	138	927	15.0	25.0
2	申静	中国药科大学生命科学与技术学院	4	7	2.0	2.0
3	罗学刚	中国药科大学生命科学与技术学院	12	81	4.0	9.0
4	王淑珍	中国药科大学生命科学与技术学院	12	5	2.0	2.0
5	丁艳	中国药科大学生命科学与技术学院	3	7	2.0	2.0