人肽脱甲酰基酶基因真核表达载体的构建及在NIH3T3细胞中的表达

• 作者: 何睿 奚涛 罗学刚 邢莹莹 黄恺飞
• 来源期刊: 中国药科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 人肽脱甲酰基酶 载体 构建 NIH3乃细胞 表达
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 575-579
• 页数: 5页
• 分类号: Q75
• 字数: 3503字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5048.2008.06.022

摘要

目的:构建人肽脱甲酰基酶(HsPDF)基因的真核表达载体并转染NIH3T3细胞,研究HsPDF基因在真核细胞中的表达及功能.方法:通过RT-PCR从人宫颈癌细胞系HeLa中扩增获得HsPDF基因,克隆到真核表达栽体pcDNA3.1(一),利用阳离子脂质体转染NIH3T3细胞,G418筛选建立稳定表达细胞系;RT-PCR检测转染后HsPDF基因的mRNA转录水平;MTT法测定转染后细胞增殖能力的变化;苏木精-伊红(HE)染色观察HsPDF对NIH3T3细胞形态的影响.结果:成功构建重组表达载体peDNA3.1(一)-HsPDF.该载体被转染入NIH3T3细胞后,外源HsPDF基因获得了有效的转录与稳定表达.HsPDF显著促进NIH3T3细胞的增殖,并使细胞呈现出一定的恶变特征.结论:HsPDF基因在NIH3T3细胞中获得了稳定表达并表现出明显的生物学功能,为深入研究奠定了基础. G418筛选建立稳定表达细胞系;RT-PCR检测转染后HsPDF基因的mRNA转录水平;MTT法测定转染后细胞增殖能力的变化;苏木精-伊红(HE)染色观察HsPDF对NIH3T3细胞形态的影响.结果:成功构建重组表达裁体peDNA3.1 一)-HsPDF.该载体被转染入NIH3T3细胞后,外源HsPDF基因获得了有效的转录与稳定表达.HsPDF显著促进NIH3T3细胞的增殖,并使细胞呈现出一定的恶变特征.结论:HsPDF基因在NIH3T3细胞中获得了稳定表达并表现出明

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邢莹莹	中国药科大学生物技术研究中心	39	210	9.0	14.0
2	奚涛	中国药科大学生物技术研究中心	138	927	15.0	25.0
3	罗学刚	中国药科大学生物技术研究中心	12	81	4.0	9.0
4	黄恺飞	中国药科大学生物技术研究中心	2	19	1.0	2.0
5	何睿	中国药科大学生物技术研究中心	2	19	1.0	2.0