p16真核表达载体的构建及其稳定表达的NIH3T3细胞株的建立

• 作者: 于业辉 张守纯 李华 王太一
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因,p16 真核细胞,N3T3 转染 表达
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 23-26
• 页数: 4页
• 分类号: Q813
• 字数: 2542字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2005.01.006

摘要

目的构建Pcr(R)3.1/p16真核表达质粒,并建立其稳定表达的NIH3T3细胞株.方法将人的p16cDNA亚克隆至Pcr(R)3.1,将该重组质粒转化DH5α感受态大肠埃希菌,筛选阳性克隆,进行EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切鉴定及DNA测序,将已鉴定的pCR(R)3.1/p16经脂质体介导转染至NIH3T3细胞中.结果重组质粒双酶切后,出现约800 bp片段,提示p16cDNA片断已插入pCR(R)3.1多克隆位点内,DNA测序显示p16 cDNA按照正确方向和阅读框插入表达载体pCR(R)3.1.通过pCR(R)3.1/p16转染NIH3T3细胞,获得10个G418抗性克隆,其中2个为RT-PCR阳性.结论成功构建pCR(R)3.1/ p16真核表达载体并建立了其稳定表达的NIH3T3细胞株.为建立p16转基因鼠奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张守纯	中国医科大学基础医学院	40	138	6.0	10.0
3	于业辉	沈阳农业大学畜牧兽医学院	39	135	8.0	10.0
4	王太一	中国医科大学基础医学院	30	279	9.0	16.0
5	李华	中国医科大学基础医学院	56	397	12.0	18.0