人巨噬细胞金属弹力酶催化域基因的克隆及表达

• 作者: 沈际佳 石海 胡乃中 许建明 鲍德明
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 基质金属蛋白酶类 基因表达 克隆,分子
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 269-271
• 页数: 3页
• 分类号: R341|R345.9|R394.2|R394.3
• 字数: 2608字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1492.2007.03.011

摘要

目的 克隆人巨噬细胞金属弹力酶催化域(HMEcd)基因,构建原核表达质粒,在大肠杆菌中表达HMEcd基因融合蛋白.方法 用RT-PCR方法提取人胃癌组织总RNA并扩增出HMEcd cDNA,克隆入pMD18-T载体,构建克隆载体pMD18-T-HMEcd,双酶切鉴定及DNA测序正确后再将HMEcd cDNA亚克隆至pET-28a(+)载体,构建原核表达载体pET-28a(+)-HMEcd,转化大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达,并行SDS-PAGE及Western blotting鉴定.结果 RT-PCR获得预期的HMEcd cDNA,双酶切鉴定及DNA测序证实将HMEcd基因分别正确插入克隆载体和原核表达载体中,SDS-PAGE及Western blotting鉴定证实表达出HMEcd融合蛋白.结论 成功表达出HMEcd基因融合蛋白,为进一步功能实验研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈际佳	安徽医科大学病原生物学教研室	84	364	10.0	14.0