突变减毒志贺样毒素Ⅰ真核表达载体的抗肿瘤血管活性

• 作者: 于津浦 付晓达 任秀宝 刘虹 曹水 郝希山 魏枫
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 志贺样毒素Ⅰ 突变减毒 真核表达 内皮细胞 抗血管生成 卵巢肿瘤
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 322-327
• 页数: 6页
• 分类号: R392.12
• 字数: 4562字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2007.04.005

摘要

目的: 考察突变减毒志贺样毒素Ⅰ(Shiga-like toxin 1, Stx1) 真核表达载体抗肿瘤血管的活性.方法: 使用流式细胞仪检测突变减毒Stx1真核表达载体转染对CHO细胞的影响;分别建立稳定表达1/10毒性、1/100毒性的突变减毒Stx1的CHO细胞株,使用这2个细胞株和对照细胞株的培养上清分别处理人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell, HUVEC),观察其对HUVEC的增殖、迁移能力和形成管样结构能力的影响;使用人卵巢癌SKOV3荷瘤裸鼠模型,不同毒性突变减毒Stx1真核表达载体经脂质体包裹后肿瘤局部注射给药,观察突变减毒Stx1对肿瘤新生血管的作用.结果: 突变减毒Stx1真核表达载体转染的CHO细胞未出现明显的凋亡或坏死改变;获得稳定表达1/10毒性、1/100毒性的突变减毒Stx1的基因工程细胞株,这些细胞株的培养上清与正常CHO细胞培养上清相比,能够在体外实验中抑制HUVEC的生长(P＜0.05),且该作用可以被Stx1 B亚基抗体阻断;突变减毒Stx1能够抑制HUVEC的迁移能力和管样结构形成能力;体内实验显示1/10毒性、1/100毒性的突变减毒Stx1真核表达载体治疗组与空载体对照组或生理盐水对照组相比,肿瘤微血管密度明显下降(P＜0.01).结论 :成功建立了分泌性表达突变减毒Stx1的CHO细胞株.证实突变减毒Stx1能够有效地抑制HUVEC的生长及正常功能的发挥.体内实验显示突变减毒Stx1真核表达载体可以抑制裸鼠体内SKOV3移植瘤的血管生成.