突变减毒志贺样毒素Ⅰ真核表达载体的构建及其抗卵巢癌的活性

• 作者: 于津浦 付晓达 任秀宝 刘虹 郝希山 魏枫
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 志贺样毒素Ⅰ 突变 减毒 真核表达 卵巢癌
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 435-441
• 页数: 7页
• 分类号: R73
• 字数: 4970字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2006.06.007

摘要

目的: 构建表达突变减毒的志贺样毒素Ⅰ(Shiga-like toxin 1, Stx1) 的真核表达载体,并考察其抗人卵巢癌细胞SKOV3的活性.方法: 重叠PCR法构建毒性为原毒素毒性1/10和1/100的突变减毒Stx1编码序列,T-A克隆并测序后分别连入真核表达载体pcDNA3.1.转染SKOV3细胞,RT-PCR法检测Stx1 mRNA在SKOV3细胞中的表达,观察突变减毒Stx1对SKOV3细胞周期的影响和致SKOV3细胞死亡的方式.使用SKOV3荷瘤裸鼠模型,不同毒性突变减毒Stx1真核表达载体经脂质体包裹后肿瘤局部注射给药,评价其体内抑瘤能力.结果: 突变减毒Stx1真核表达载体经酶切和测序鉴定与预期突变序列一致;RT-PCR证实转染后的SKOV3细胞中存在目的mRNA;体外实验观察到该载体转染可以使人卵巢癌SKOV3细胞的细胞周期阻滞于G2/M期,转染后SKOV3细胞死亡的主要途径是坏死;体内实验显示突变减毒Stx1真核表达载体可以抑制裸鼠体内SKOV3移植瘤的生长.结论: 通过重叠PCR方法获得2种突变减毒Stx1编码序列,成功构建了相应的真核表达载体,并证实该载体具有明显的抗卵巢癌活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郝希山	天津医科大学附属肿瘤医院免疫学研究室	186	2015	24.0	36.0
2	任秀宝	天津医科大学附属肿瘤医院免疫学研究室	80	603	13.0	22.0
3	刘虹	天津医科大学附属肿瘤医院免疫学研究室	24	225	7.0	14.0
4	魏枫	天津医科大学附属肿瘤医院免疫学研究室	9	27	3.0	4.0
5	于津浦	天津医科大学附属肿瘤医院免疫学研究室	30	307	10.0	17.0
6	付晓达	天津医科大学附属肿瘤医院免疫学研究室	1	4	1.0	1.0