pcDNA3.1-hTERT真核表达载体的构建及其抗肿瘤效应

• 作者: 丁兰萍 刘红梅 宫亚欧 张巧 杨胜利 赵国强 钱丽丽
• 来源期刊: 郑州大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 人端粒酶逆转录酶 真核表达载体 荷瘤小鼠 抗肿瘤免疫应答
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 483-486
• 页数: 4页
• 分类号: R730.3
• 字数: 3465字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2008.03.024

摘要

目的:构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)真核表达载体pcDNA3.1-hTERT,并观察其对荷瘤小鼠的抗肿瘤效应.方法:用RT-PCR方法扩增出带有Hind Ⅲ, BamHⅠ酶切位点的hTERT基因片段,与pGEM-T Easy克隆载体连接,筛选出阳性克隆,酶切获得目的片段,与pcDNA3.1载体连接,构建pcDNA3.1-hTERT表达载体.将真核表达载体pcDNA3.1-hTERT注射移植性H22肝癌模型C57BL/6小鼠,并设PBS组及转染空质粒pcDNA3.1组,观察3组的抗肿瘤效应.结果与结论:成功构建pcDNA3.1-hTERT真核表达载体.该载体中的hTERT基因片段全长为951 bp,可编码相对分子量为37 000、由317个氨基酸构成的多肽.该基因片段与GenBank公布的相应基因进行同源性比较,核苷酸序列的同源性为98.73%,编码产物的氨基酸序列的同源性为99.68%.该真核表达载体免疫荷瘤小鼠后,pcDNA3.1-hTERT组肿瘤生长受到抑制,且该组生存期分别长于PBS组及pcDNA3.1组 (P<0.05);pcDNA3.1- hTERT组的IL-2、IFN-γ细胞因子水平也均高于PBS组与pcDNA3.1组(P<0.05).提示该真核表达载体在受试动物体内可有效地诱导特异性抗肿瘤免疫应答.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张巧	郑州大学公共卫生学院卫生毒理学教研室	45	147	7.0	9.0
2	赵国强	郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室	245	807	11.0	16.0
3	杨胜利	郑州大学基础医学院基础肿瘤学教研室	33	134	7.0	10.0
4	刘红梅	郑州大学基础医学院基础肿瘤学教研室	11	17	3.0	3.0
5	宫亚欧	郑州大学基础医学院基础肿瘤学教研室	9	73	5.0	8.0
6	丁兰萍	郑州大学基础医学院基础肿瘤学教研室	3	25	2.0	3.0
7	钱丽丽	郑州大学基础医学院基础肿瘤学教研室	2	3	1.0	1.0