人白细胞介素4的原核表达、复性、纯化及生物学活性鉴定

• 作者: 崔凯军 文艳君 文静 李炯 田聆 范琳玉 赵志伟 邓洪新 阚兵 陈平 魏于全
• 来源期刊: 生物医学工程学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 重组人白细胞介素4 包涵体 复性 纯化 生物学活性 树突状细胞
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 866-869
• 页数: 4页
• 分类号: R4
• 字数: 2905字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1001-5515.2007.04.033

摘要

用PCR方法从pORF-hIL4质粒中扩增重组人白细胞介素4(hIL-4)的基因,构建PQE60原核表达载体并诱导其目的蛋白的表达.对表达的目的蛋白的可溶性进行鉴定,发现hIL-4基因表达产物在大肠杆菌中主要以不溶性包涵体形式存在, 经过超声波破细菌、包涵体提取、洗涤处理后,用5 mol/L盐酸胍变性溶解包涵体沉淀,上清稀释复性后透析,再经镍亲和层析进行纯化.纯化后的hIL-4进行TF-1细胞体外增生实验检测其生物学活性后,可用于人外周血树突状细胞的体外诱导培养.