IGF-Ⅱ P3启动子调控融合基因质粒构建及在肝癌细胞中表达

• 作者: 周鸿科 杨冬华 汤绍辉 黄卫
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胰岛素样生长因子Ⅱ 绿色荧光蛋白 癌,肝细胞 基因疗法
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1488-1494
• 页数: 7页
• 分类号: R363
• 字数: 2650字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2007.08.007

摘要

目的:构建人胰岛素样生长因子Ⅱ基因(IGF-Ⅱ)P3启动子驱动单纯疱疹病毒胸苷激酶(tk)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合基因穿梭质粒,观察其在肝癌细胞系HepG2及宫颈癌细胞系HeLa细胞中的表达及其作用.方法:应用基因重组技术,构建IGF-Ⅱ P3启动子驱动EGFP与tk融合表达穿梭质粒载体,脂质体转染技术将其转入HepG2及HeLa中,48 h后荧光显微镜下观察荧光表达,RT-PCR法检测tk和EGFP mRNA表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验检测转染融合蛋白载体后给予不同浓度的GCV对HepG2及HeLa细胞毒作用.结果:酶切鉴定和测序分析证实重组质粒构建成功;转染此穿梭质粒的细胞中仅有HepG2细胞检测到绿色荧光;RT-PCR检测到tk和EGFP的mRNA仅在HepG2细胞中表达;GCV对转染了携此质粒载体的HepG2细胞有选择性细胞毒作用.结论:成功构建IGF-Ⅱ P3启动子驱动携带tk与EGFP融合基因穿梭质粒载体,转染后对人肝癌细胞系HepG2有选择性杀伤作用,为进一步靶向性肝癌腺病毒基因治疗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨冬华	暨南大学附属第一医院消化科	108	432	10.0	15.0
2	汤绍辉	暨南大学附属第一医院消化科	164	444	9.0	14.0
3	黄卫	暨南大学附属第一医院消化科	49	135	7.0	9.0
4	周鸿科	暨南大学附属第一医院消化科	16	54	5.0	6.0