丙型肝炎病毒1b DY株ns5a基因的克隆及其所表达融合蛋白的免疫原性分析

• 作者: 付慧 张丽莉 成凡 曹美茹 楚雍烈 王勇健 茹小荣
• 来源期刊: 陕西医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎病毒/免疫学 @ns5a基因 克隆,分子/免疫学 基因融合/免疫学 基因表达 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 特约稿件
• 页码范围: 259-261
• 页数: 3页
• 分类号: R5
• 字数: 2695字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7377.2007.03.001

摘要

目的:克隆和表达丙型肝炎病毒(HCV)1b型地方株DY株ns5a基因,为进一步研究和应用该基因及其表达产物奠定基础.方法:采用基因重组技术完成实验.设计特异的引物,采用巢式PCR法,从含HCV 1b DY株全长cDNA的质粒HCV17中扩增出目的片段,约480bp;将其插入克隆载体pMD18-Tvector中,再与原核表达载体pET-28a重组;经酶切、PCR及测序鉴定后转化入BL21菌株,在IPTG诱导下进行融合蛋白的表达.采用SDS-PAGE电泳及Western-blot检测NS5A蛋白表达水平.结果:含有HCV1b DY株ns5a基因的重组体构建成功,并得以表达蛋白,并且NS5A蛋白具有与HCV患者阳性血清中的多克隆的结合活性,具有很好的免疫原性.结论:运用原核细胞基因工程技术成功构建和表达了HCV1b DY株ns5a基因,为进一步研究HCVns5a的基因型及探讨该基因编码的NS5A蛋白的性质和生物学活性创造条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	楚雍烈	西安交通大学医学院病原生物学教研室	76	311	10.0	13.0
2	付慧	西安医学院生物化学教研室	9	11	2.0	3.0
3	成凡	西安医学院生物化学教研室	12	25	3.0	4.0
4	张丽莉	西安医学院生物化学教研室	4	11	2.0	3.0
5	曹美茹	西安医学院生物化学教研室	4	13	2.0	3.0
6	茹小荣	西安医学院生物化学教研室	2	1	1.0	1.0
7	王勇健	西安医学院生物化学教研室	14	11	1.0	3.0