14-3-3 zeta蛋白C-端多肽抗体的制备与鉴定

• 作者: 吴东明 谭振 谭阳 黄蓓
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 14-3-3 zeta蛋白 C-端多肽 多克隆抗体 生物信息学 特异性
• 年，卷（期）: 2007,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 814-817
• 页数: 4页
• 分类号: R392-33|R730.43
• 字数: 3639字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2007.11.006

摘要

目的 制备14-3-3 zeta蛋白C-端多肽多克隆抗体,并鉴定其特异性.方法 用生物信息学分析14-3-3 zeta蛋白的同源性、亲水性和抗原性,设计并合成zeta蛋白C-端特异性的氨基酸序列,将其与牛血清白蛋白铰链;分别转化14-3-3的7个亚型质粒于大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,并分离纯化His-zeta融合蛋白;分别以zeta C-端多肽及zeta融合蛋白为抗原,免疫新西兰大耳白兔,制备多克隆抗体;用Western blot分析zeta蛋白C-端多肽抗体亚型特异性,并用该特异性抗体检测zeta蛋白在COS-7细胞中的分布规律.结果 在14-3-3的7个亚型蛋白存在的条件下,zeta蛋白C-端多肽抗体仅识别zeta亚型蛋白,而zeta融合蛋白抗体可以识别gamma、zeta、tau 3种亚型;14-3-3 zeta蛋白主要分布在COS-7细胞质一侧.结论 已获得了亚型特异性的14-3-3 zeta多克隆抗体,该抗体可用于14-3-3 zeta免疫细胞化学等分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄蓓	安徽大学生命科学院安徽省生态工程与生物技术重点实验室	33	150	7.0	11.0
2	吴东明	安徽大学生命科学院安徽省生态工程与生物技术重点实验室	2	2	1.0	1.0
3	谭阳	安徽大学生命科学院安徽省生态工程与生物技术重点实验室	3	12	2.0	3.0
4	谭振	安徽大学生命科学院安徽省生态工程与生物技术重点实验室	1	0	0.0	0.0