NSE启动子调控的pNSE-IRES2-EGFP-p27双顺反子真核表达载体的构建及表达分析

• 作者: 张强 徐逸 朱舟 王伟 陈华先 陈晨
• 来源期刊: 中国康复
• 学科: 医学
• 关键词: 启动子 构建 靶向性 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 医学康复
• 页码范围: 382-385
• 页数: 4页
• 分类号: R49|R741
• 字数: 2711字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1001-2001.2007.06.006

摘要

目的:构建并鉴定带NSE启动子的Flag-p27和EGFP双顺反子真核表达载体pNSE-IRES2-EGFP-p27,转染原代培养的神经元,观察其表达.方法:通过质粒抽提,电泳、酶切、连接、转化等多种基因工程技术,经多步亚克隆后完成能同时表达p27和EGFP基因的神经元特异性表达载体pNSE-IRES2-EGFP-p27;转染体外培养的神经元观察EGFP的表达及通过免疫荧光细胞化学技术观察p27的表达.结果:经酶切和测序鉴定,成功构建真核表达载体pNSE-IRES2-EGFP-p27;转染pNSE-IRES2-EGFP-p27后神经元中可见EGFP的表达,且EGFP阳性细胞中p27表达水平明显增高.结论:NSE启动子能启动目的基因p27和EGFP在神经元的表达,连于Flag-p27的下游EGFP可作为报告基因,指示p27的表达情况.带启动子NSE的Flag-p27和EGFP双顺反子真核表达载体的构建为进一步研究神经元细胞周期与神经系统疾病的关系,并为寻找神经系统疾病的有效基因治疗途径奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王伟	华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科	371	2310	22.0	32.0
2	张强	华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科	118	791	15.0	22.0
3	朱舟	华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科	43	158	7.0	11.0
4	徐逸	华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科	24	61	4.0	6.0
5	陈晨	华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科	47	256	8.0	14.0
6	陈华先	华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科	7	12	2.0	2.0