双顺反子真核表达载体pVAX1-IRES的构建与鉴定

• 作者: 于继云 刘国栋 刘宁 刘荷中 张亮 王浩 贾锐 阎瑾琦
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 医学
• 关键词: 内部核糖体进入位点 真核表达 疫苗,DNA
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 111-115
• 页数: 5页
• 分类号: R730.5
• 字数: 4799字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2008.02.003

摘要

目的:为适应恶性肿瘤免疫治疗中多基因联合应用的需要,在真核表达载体pVAX1的基础上,利用内部核糖体进入位点IRES序列,构建双顺反子真核表达载体pVAX1-IRES,以增强DNA疫苗的免疫疗效.方法:通过PCR扩增获得目的基因IRES并定向克隆到pVAX1载体中,然后在IRES序列的上下游分别插入红色荧光蛋白基因DsRed1和增强型绿色荧光蛋白基因EGFP,瞬时转染人胚胎肾细胞293T,通过流式细胞术和免疫荧光验证基因表达.结果:pVAX1-IRES经相应酶切和测序鉴定,与预期设计一致,DsRed1基因和EGFP基因在pVAX1-IRES载体中,不仅可以分别表达,而且可以同时表达,显示该双顺反子真核表达载体构建成功.结论:pVAX1-IRES双顺反子表达载体的构建,为基因联合表达和恶性肿瘤的免疫治疗作了必要准备.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	阎瑾琦	军事医学科学院基础医学研究所	25	54	4.0	5.0
2	于继云	军事医学科学院基础医学研究所	59	145	6.0	9.0
3	刘荷中	军事医学科学院基础医学研究所	20	81	5.0	7.0
4	张亮	军事医学科学院基础医学研究所	21	50	4.0	5.0
5	王浩	军事医学科学院基础医学研究所	5	26	3.0	5.0
6	贾锐	军事医学科学院基础医学研究所	6	22	2.0	4.0
7	刘国栋	军事医学科学院基础医学研究所	2	13	2.0	2.0
8	刘宁	军事医学科学院基础医学研究所	3	19	2.0	3.0