乳酸菌素Gassericin T基因的人工合成及其组成型表达载体的构建

• 作者: 刘丽凡 王好 赵瑞丽 韩文瑜
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 乳酸菌素 Gassericin T 基因合成 组成型表达 启动子
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 227-229
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 2770字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2007.02.015

摘要

目的:为了研究乳酸菌素Gassericin T的作用机制及应用价值,人工合成Gassericin T基因并构建能高效表达外源蛋白的毕赤酵母组成型表达载体.方法:应用PCR方法从毕赤酵母染色体中扩增GAP启动子,经测序正确后与已线性化的不含pAOX1启动子的毕赤酵母诱导型表达载体pPIC9K连接,转化大肠杆菌DH5α.根据Gassericin T的基因序列,把Gassericin T的结构基因gatA的密码子转换成毕赤酵母偏爱的形式,设计了6条59 nt的寡聚核苷酸引物,通过3次连续PCR反应,人工合成gatA片段(简称gat基因),经测序正确后插入pGAP9K质粒的多克隆位点.结果:用GAP启动子(pGAP)取代了pPIC9K上的pAOX1,构建了毕赤酵母组成型表达载体pGAP9K;PCR拼接获得250 bp的目的基因序列,将目的基因克隆于pGAP9K,获得组成型表达载体pGAP9K-gat.结论:为下一步在毕赤酵母中组成型表达外源蛋白,研究其作用机理和遗传机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩文瑜	吉林大学农学部畜牧兽医学院	159	1086	16.0	26.0
2	刘丽凡	吉林大学农学部畜牧兽医学院	3	3	1.0	1.0
3	王好	吉林农业大学动物科技学院	41	182	9.0	12.0
4	赵瑞丽	吉林大学农学部畜牧兽医学院	3	3	1.0	1.0