人血管抑制因子Vasostatin(120～180aa)的真核表达、纯化及活性鉴定

• 作者: 刘建巨 宋娅莉 王建文
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血管抑制因子 真核表达 金属螯合层析 血管内皮细胞 活性
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 725-728,740
• 页数: 5页
• 分类号: R392.33|Q786
• 字数: 3505字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2007.10.004

摘要

目的 利用毕赤酵母表达系统表达人血管抑制因子Vasostatin(120～180aa),经纯化后,观察其抑制血管内皮细胞增殖的活性.方法 采用PCR技术扩增出人血管抑制因子Vasostatin(120～180aa)的全长cDNA序列,将其克隆至真核表达载体pPIC9K中,转化毕赤酵母KM71,以甲醇诱导表达,并进行Western blot检测及金属螯合层析纯化.采用MTT法检测纯化的血管抑制因子对血管内皮细胞增殖的抑制作用.结果 重组表达质粒pPIC9K-Vasostatin(120～180aa)经菌落PCR、酶切和测序鉴定,证明构建正确.经Western blot检测可见一条特异条带,纯化后的蛋白纯度达88.76%,浓度为300 μg/ml,在体外可抑制人脐静脉血管内皮细胞ECV304的增殖.结论 人血管抑制因子Vasostatin(120～180aa)可在毕赤酵母中以分泌形式表达,并具有抑制血管内皮细胞增殖的活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王建文		6	7	2.0	2.0
2	刘建巨		6	17	2.0	4.0