3种纯化重组禽流感病毒NS1抗原方法的比较

• 作者: 张莉 李永清 章振华 赵燕岭 霍惠玲
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 禽流感病毒NS1抗原 重组抗原 纯化
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 774-777
• 页数: 4页
• 分类号: Q503|Q78
• 字数: 4882字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2007.05.014

摘要

目的:摸索出最佳分离纯化和复性重组禽流感病毒NS1抗原的方法,得到高纯度的重组蛋白.方法:将重组质粒pET32a-NS1转染大肠杆菌BL21(DE3)后获得表达,分别以尿素变性、复性,Ni-NTA His.Bind Resin亲和,以及脱氧胆酸钠-N-十二烷基肌氨酸钠(DOC-SKL)洗涤溶解等3种纯化方法从表达产物包涵体中分离纯化NS1蛋白,并进行比较研究.结果:原核表达得到相对分子质量约45 000的目的蛋白;3种纯化方法均能分离和纯化出NS1重组蛋白,其中尿素纯化的蛋白纯度为50%～60%,Ni-NTA His.Bind Resin亲和纯化的蛋白纯度为80%～90%,DOC-SKL纯化的蛋白纯度达95%以上;Western blot检测表明,复性后的纯化蛋白具有良好的生物学活性.结论:应用十二烷基肌氨酸钠洗涤纯化是最佳的纯化NS1蛋白的方法,所获得的蛋白可作为包被ELISA的抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张莉	北京市农林科学院畜牧兽医研究所	58	245	9.0	12.0
2	章振华	北京市农林科学院畜牧兽医研究所	50	172	6.0	10.0
3	李永清	北京市农林科学院畜牧兽医研究所	43	245	9.0	14.0
4	霍惠玲		9	36	4.0	5.0
5	赵燕岭		1	1	1.0	1.0