小鼠Omi/HtrA2基因克隆、测序及辐射诱导表达质粒pIRESEGR1p-Omi/HtrA2的构建

• 作者: 孙旭芳 白祥军 胡晓勇
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 质粒 逆转录-聚合酶链反应 序列分析
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 355-357
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 1666字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1001-9030.2007.03.036

摘要

目的 分别从小鼠肝脏脑组织克隆EGR-1基因启动子、Omi/HtrA2,并构建含EGR-1启动子的辐射诱导表达质粒pIRESEGR1p-Omi/HtrA2.方法 利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法,以小鼠脑组织mRNA为模板,扩增获得全长Omi/HtrA2,与pMD-19T载体连接做全自动测序,以小鼠肝脏mRNA为模板,扩增获得EGR-1启动子,与pGEMT载体连接做全自动测序,并利用基因重组技术构建含EGR-1启动子的辐射诱导表达质粒pIRESEGR1p-Omi/HtrA2.结果 经测序证实获得的小鼠EGR-1启动子、Omi/HtrA2序列与文献报道完全一致,并构建了含EGR-1启动子的辐射诱导表达质粒pIRESEGR1p-Omi/HtrA2.结论 成功克隆了小鼠EGR-1基因启动子、Omi/HtrA2的cDNA序列,构建了辐射诱导表达质粒pIRESEGR1p-Omi/HtrA2.