Omi/HtrA2 shRNA重组真核表达质粒的构建及其在大鼠肾小管上皮细胞缺氧/复氧模型中的作用

• 作者: 乔晞 李荣山 王利华 董华
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Omi/HtrA2 shRNA 重组质粒
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 214-217
• 页数: 4页
• 分类号: Q782
• 字数: 3218字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-6611.2008.03.007

摘要

目的 构建在哺乳动物细胞中表达的Omi/HtrA2短发夹RNA(shRNA)的表达质粒,观察其对大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E缺氧/复氧模型中Omi/HtrA2表达的影响.方法 根据Genbank中Omi/HtrA2 mRNA分别设计2对多聚核苷酸序列,退火形成互补双链DNA,分别克隆至经双酶切后的载体Pgenesil-1上,构建Omi/HtrA2特异性的shRNA表达载体PGP1和PGP2,进行酶切和测序鉴定.制作NRK-52E缺氧/复氧模型,将表达质粒通过脂质体介导转染NRK-52E,Westernblot检测Orni/HtrA2蛋白质表达.结果 将合成的DNA片段退火后克隆至Pgenesil-1载体上,构建Omi/HtrA2特异shRNA表达载体PGP1和PGP2;经酶切和测序证实构建成功,无碱基突变发生.将表达质粒介导转染NRK-52E缺氧/复氧模型后,细胞Chai/HtrA2蛋白质表达显著降低.结论 成功构建针对大鼠Omi/HtrA2基因的shRNA表达载体PGP1和PGP2,它们能有效抑制NRK-52E缺氧/复氧模型中Ckni/HtrA2表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李荣山	山西医科大学第二临床医学院肾内科	209	1017	14.0	21.0
2	乔晞	山西医科大学第二临床医学院肾内科	46	154	7.0	10.0
3	王利华	山西医科大学第二临床医学院肾内科	72	325	6.0	15.0
4	董华	山西医科大学第二临床医学院肾内科	5	20	3.0	4.0