结肠癌羟基喜树碱耐药细胞SW1116/HCPT酵母双杂交cDNA文库的构建和鉴定

• 作者: 冉志华 萧树东 陈翔 靳西凤
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 酵母细胞 SMART技术 酵母双杂交cDNA文库 同源重组
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 研究快报
• 页码范围: 500-504
• 页数: 5页
• 分类号: R9
• 字数: 3888字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2007.05.014

摘要

目的:构建羟基喜树碱耐药结肠癌细胞株SW1116/HCPT细胞的酵母双杂交cDNA文库.方法:用TRIzol从SW1116/HCPT细胞提取总RNA,采用CLONTECH SMART (Switching mechanism at 5'end of RNA transcript)技术和同源重组(homologous recombination)的方法构建SW1116小CPT细胞的cDNA文库.结果:提取的RNA的A260/A280为1.98,甲醛变性琼脂糖凝胶电泳示出28S rRNA、18S rRNA及5S rRNA 3条特异性带,28S与18S带浓度及亮度比值约为2.文库ds cDNA smear较长分布在0.1-5kb,成长瀑布条带,而且在接近1 kb的区域有密集的带子,为高丰度表达基因.依据生长菌落计数,共获得(1.2-1.9)×106个转化子,重组率达93.7%,文库插入片段大小为0.2-5 kb.结论:成功构建了SW1116/HCPT cDNA文库.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冉志华	上海交通大学医学院附属仁济医院上海市消化疾病研究所	75	602	12.0	21.0
2	靳西凤	上海交通大学医学院附属仁济医院上海市消化疾病研究所	6	30	4.0	5.0
3	陈翔	上海交通大学医学院附属仁济医院上海市消化疾病研究所	35	224	9.0	12.0
4	萧树东	上海交通大学医学院附属仁济医院上海市消化疾病研究所	70	1624	17.0	39.0