结核分枝杆菌分泌蛋白MPT64的克隆表达和纯化

• 作者: 丁元生 唐宇龙 杨华 毕爱笑 秦莲花 胡忠义 郑瑞娟
• 来源期刊: 国际呼吸杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 MPT64 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2007,（19）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1441-1443
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 2120字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-436X.2007.19.001

摘要

目的 构建结核分枝杆菌分泌蛋白MPT64原核表达载体并进行表达和纯化.方法 以结核分枝杆菌标准株H37Rv基因组DNA为模板扩增出MPT64基因,产物经纯化回收后与载体pMD-T连接转化,酶切鉴定,克隆到pET21a原核表达载体,测序鉴定插入序列完全正确者转化大肠杆菌BL21,诱导表达MPT64融合蛋白,利用亲和层析纯化表达产物,SDS-PAGE电泳进行鉴定.结果 成功构建MPT64表达载体,SDS-PAGE电泳鉴定成功表达MPT64蛋白.并以此蛋白进行结核抗体的检测,其特异性和敏感性分别为96%和43%.结论 成功表达结核分枝杆菌MPT64蛋白,并进行特异性和敏感性的检测,证明重组的MPT64蛋白有希望成为结核病血清学诊断的组合抗原的候选者之一.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡忠义	上海市结核重点实验室同济大学	11	88	3.0	9.0
2	秦莲花		4	23	3.0	4.0
3	郑瑞娟		4	23	3.0	4.0
4	杨华		3	6	2.0	2.0
5	丁元生		2	7	2.0	2.0
6	唐宇龙		1	2	1.0	1.0
7	毕爱笑		1	2	1.0	1.0