携带c-Met短发夹结构重组腺相关病毒的包装及滴度测定

• 作者: 王凯忠 王忠山 赵慧 路英丽
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 原癌基因蛋白质c-met 腺相关病毒 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 947-951
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3263字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-587X.2007.06.001

摘要

目的:包装带有人U6启动子及c-Met短发夹环的重组腺相关病毒,为抑制c-Met的表达及进行肿瘤基因治疗研究奠定基础.方法:通过PCR方法将带有c-Met短发夹结构的片段构建至人U6启动子下游,将U6shMet构建至腺相关病毒载体质粒pSNAV中,将pSNAVUshMet转染BHK细胞,经G418筛选后加辅毒rHSV1-repcap包装成携带U6shMet的重组腺相关病毒.SDS-PAGE电泳分析病毒纯度,斑点杂交测定病毒滴度.结果:获得了2段带有c-Met短发夹结构的片段U6shMet1和U6shMet2,成功包装了2个带有U6shMet序列的重组腺相关病毒rAAVUshMet1和rAAVUshMet2,纯化后的病毒电泳分析条带清晰、杂带少,病毒滴度均为4×1012mg·L-1.结论:成功构建了带有U6shMet的重组腺相关病毒rAAVUshMet,病毒纯度好、滴度高,为抑制c-Met的表达及进行肿瘤基因治疗提供了运载工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王忠山	吉林大学第二医院妇产科	57	356	12.0	16.0
2	赵慧	吉林大学基础医学院组织学与胚胎学教研室	44	181	7.0	11.0
3	王凯忠	吉林大学第一医院胸外科	49	224	7.0	13.0
4	路英丽	吉林大学第二医院妇产科	29	175	8.0	13.0