唾液HRP5第17位密码子反义突变对其在毕赤酵母中表达的影响

• 作者: 周崎 崔红 罗德生 蒋智勇 赵亚华 赵长臣 金科华
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 唾液富组蛋白5 念珠菌,白色 基因表达
• 年，卷（期）: 2007,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 707-709
• 页数: 3页
• 分类号: R379.4
• 字数: 3026字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2007.07.017

摘要

目的 在毕赤酵母中表达唾液富组蛋白5(HRP5)基因原始序列hrp5及突变序列hrp5'(Lys17→Asn),比较表达量及抗白色念珠菌活性.方法 选用毕赤酵母偏爱密码子,设计3'端互补、5'端带酶切位点的两对引物,PCR合成hrp5和hrp5',克隆至pPICZα-A,转化大肠杆菌,将酶切、测序鉴定的阳性重组质粒pPICZα-A-hrp5和pPICZα-A-hrp5'经Sac I线性化后电击转化GS115,筛选阳性菌落,PCR鉴定,甲醇诱导表达,比较抗菌活性,测定表达量.结果 hrp5及hrp 5'正确整合到GS115基因组中,突变前后表达产物与HRP5标准品活性相当,表达量分别为4μmol/L、5μmol/L.结论 HRP5在毕赤酵母中成功表达,活性区Lys17突变为Asn使表达量提高25%,而对其杀菌活性无影响.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵亚华	华南农业大学生命科学学院生物化学教研室	31	339	9.0	17.0
2	赵长臣	华南农业大学生命科学学院生物化学教研室	3	4	1.0	2.0
3	崔红	华南农业大学生命科学学院生物化学教研室	4	13	3.0	3.0
4	蒋智勇	广东省兽医研究所猪病研究室	1	0	0.0	0.0
5	周崎	咸宁学院医学院	1	0	0.0	0.0