小鼠PPARδ腺病毒载体的构建及其在INS-1细胞中的表达

• 作者: 周艳 姜友昭 张玲 陈兵
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 腺病毒载体 PPARδ INS-1细胞
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 68-70
• 页数: 3页
• 分类号: R322.57|R394-33|R394.2
• 字数: 2548字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2007.01.021

摘要

目的 构建含有小鼠过氧化物酶增殖激活受体δ(peroxisome proliferate activated receptor delta,PPARδ)基因的重组腺病毒表达载体.方法 通过Kpn Ⅰ和EcoRⅤ双酶切,从pCDNA3.0-mPPARδ载体中得到含有小鼠PPARδ全长编码序列的片段,将mPPARδ与pAdtrack-CMV相连接并用Pme Ⅰ线性化后,转化含有pAdeasy骨架质粒的细菌BJ5183,在细菌内同源重组后得到pAd-mPPARδ质粒.pAd-mPPARδ经Pac Ⅰ线性化后用LipofectamineTM 2000转染HEK293细胞,包装得到含PPARδ基因的病毒重组子,将病毒重组子在HEK293细胞中扩增后,反复冻融得到滴度较高的含PPARδ的病毒液.将收集的病毒液感染INS-1细胞,绿色荧光观察GFP和Western blot检测PPARδ蛋白的表达.结果 成功构建了含有小鼠PPARδ基因的重组腺病毒载体,病毒滴度为1.5×1010 pfu/ml.重组腺病毒感染后可使INS-1细胞PPARδ蛋白表达明显增加.结论 该重组腺病毒载体的构建为研究PPARδ基因在胰岛细胞中生物学功能提供了一定的工作基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜友昭	第三军医大学西南医院内分泌科	30	138	6.0	10.0
2	张玲	第三军医大学西南医院门诊部	113	736	13.0	20.0
3	陈兵	第三军医大学西南医院内分泌科	146	658	13.0	18.0
4	周艳	第三军医大学西南医院乳腺中心	31	249	11.0	14.0