实时荧光定量PCR快速检测对虾IHHNV载量方法的建立和应用

• 作者: 何伟贤 卢亦愚 王学海 王建跃 王忠发
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 实时荧光定量PCR IHHNV 病毒载量
• 年，卷（期）: 2007,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1591-1593
• 页数: 3页
• 分类号: Q75
• 字数: 3380字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-8685.2007.09.021

摘要

目的:建立一种快速、定量、特异、灵敏的PCR方法用于对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)的早期诊断和疫情监测.方法:根据GenBank登录的IHHNV毒株序列,使用生物学软件进行序列比对,在IHHNV保守区序列设计特异性引物与Taqman探针.对实时荧光定量PCR反应条件进行优化以缩短检测时间,提高特异性、灵敏度、重复性,并与普通PCR进行盲样测试的比对.结果:本法线性范围5×102～5×107拷贝/ml,检出限5×101拷贝/ml,灵敏度超过普通PCR100倍,特异性高于普通PCR,重复性极好(S=0.035～0.39,CV=0.13%～1.05%),检测时间为普通PCR的1/5,现场盲样IHHNV检出阳性率高于普通PCR 26.00%.结论:本研究建立Taqman实时荧光定量PCR用于对虾IHHNV检测具有特异、灵敏、快速、定量、重复性好等优点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢亦愚		127	1020	16.0	23.0
2	何伟贤		11	104	6.0	10.0
3	王建跃		43	176	7.0	11.0
4	王忠发		24	143	7.0	11.0
5	王学海	浙江大学医学院病原生物研究所	2	9	2.0	2.0