真核表达载体质粒pcDNA4/rhHIF-1α的构建与鉴定

• 作者: 刘菁 徐亚娟 袁桂峰 陈森洲 黄大林
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 缺氧诱导因子-1 载体 质粒
• 年，卷（期）: 2007,（29）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 4-6
• 页数: 3页
• 分类号: R394
• 字数: 2611字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2007.29.002

摘要

目的 构建重组人缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)真核表达载体质粒pcDNA4/rhHIF-1α,为进行人HIF-1α基因的克隆与表达及其抗体的制备研究奠定基础.方法 从人血细胞中提取总RNA,RT-PCR法反转录合成cDNA.设计两对引物分别调取目的 基因片段A和B,与T载体连接后转化大肠杆菌JM109,LB平板筛选菌落,提取质粒.测序正确后双酶切先后克隆进入pcDNA4/HisMaxA载体.结果 获得重组质粒pcDNA4/rhHIF-1α,经PCR扩增获得的目的基因相对分子质量与预计相同,插入pcDNA4/HisMaxA载体部位正确.结论 重组的人HIF-1α真核表达载体质粒pcDNA4/rhHIF-1α构建成功,所选用的pcDNA4/HisMax可高表达目的基因,可用于人HIF-1α基因的克隆与表达及其抗体制备的研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄大林		47	201	9.0	11.0
2	陈森洲		77	309	9.0	12.0
3	袁桂峰		32	139	7.0	10.0
4	徐亚娟		4	3	1.0	1.0
5	刘菁		31	141	7.0	10.0