大肠杆菌原核表达载体pSBET-His的构建

• 作者: 秦西云 谭仲夏 陈正斌
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 原核表达载体 pSBET-His 构建
• 年，卷（期）: 2007,（27）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 8443-8443,8446
• 页数: 2页
• 分类号: Q936
• 字数: 1308字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2007.27.010

摘要

为了构建原核表达载体psBET-His.pSBETa质粒经Xba I和BamH I限制性内切酶双酶切,获得原核表达载体的骨架.以pET28a(+)为模板,通过高保真PCR法应用T7 promoter引物和T7 terminator引物对pET28a(+)载体T7表达区域进行扩增,PVR产物电泳纯化后经双酶切和纯化获得138 bp含His-Tag序列的片段.将pSBET原核表达载体骨架和含有His-Tag序列的片段进行连接后转入DH5α感受态细胞中,经菌落PCR及酶切筛选构建pSBET-His.成功构建了pSBET-His原核表达载体.应用该载体表达的蛋白质,可采用镍离子亲和层析法进行纯化.该研究为应用psBET-His载体进行烟草丛顶病毒OBF4的原核表达研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈正斌		2	10	2.0	2.0
5	谭仲夏		26	508	12.0	22.0
6	秦西云		29	629	12.0	25.0