果蝇防御素在毕赤酵母中的表达及活性检测

• 作者: 张黎 曾庆韬 金珊
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 防御素 抗菌肽 酵母表达
• 年，卷（期）: 2008,（z1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 456-461
• 页数: 6页
• 分类号: Q96
• 字数: 4523字
• 语种: 中文

摘要

抗菌肽是昆虫感染细菌后,由血细胞及脂肪细胞在瞬时分泌的抗菌物质.具有广谱抗菌活性和抑杀耐药菌株等优点.抗菌肽不仅抗菌谱广,而且对某些真菌、原虫、病毒及肿瘤有一定的杀灭和抑制作用,还能加速免疫和伤口愈合过程.防御素是一类在自然界中广泛存在的、具有微生物抗性的小分子抗菌肽.利用PCR技术,以果蝇总DNA为模板,扩增出两端加入了连接接头的防御素基因,将接头处理成粘性末端,将防御素基因与分泌型酵母表达载体pHBM905B重组,构建重组酵母表达载体pHBM905B/defensin,经"三明治"夹心平板筛选及菌落PCR鉴定证明目的基因已整合入酵母染色体中.挑选阳性克隆经甲醇诱导表达,以SDS-PAGE电泳对表达产物进行分析,证明表达蛋白的相对分子量约为10kD,与预期结果一致.用琼脂糖扩散法检测上清液的生物学活性.可以观察到明显的抑菌圈,显示其具有较强的抗菌活性.同时表达产物有极强的热稳定性,展示了诱人的应用前景,为进一步的开发研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾庆韬	湖北大学生命科学学院	42	232	9.0	12.0
2	金珊	湖北大学生命科学学院	15	58	5.0	7.0
3	张黎	湖北大学生命科学学院	13	49	5.0	6.0