人源化抗幽门螺杆菌尿素酶B亚单位噬菌体单链抗体库的构建和筛选

• 作者: 安黎云 王宪灵 王缚鲲 贾克然
• 来源期刊: 解放军检验医学杂志
• 关键词: 噬菌体抗体库 单链抗体 幽门螺杆菌 尿素酶B亚单位
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 微生物学与免疫学
• 页码范围: 40-42,24
• 页数: 4页
• 语种: 中文

摘要

目的 构建人源化噬菌体单链抗体库,筛选抗幽门螺杆菌(Hp)尿素酶B亚单位(UreB)特异性抗体.方法 首先检测献血员抗Hp和UreB抗体,分离阳性者外周血淋巴细胞,提取总RNA并等量混合.利用RT-PCR扩增全套重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因,采用overlap方法连接,插入噬菌体载体pComb3x构建噬菌体单链抗体库,以纯化UreB为靶标筛选特异性抗体.结果 成功获得VH和VL基因,分子量分别约为400bp和350bp.将VH和VL纯化后采用overlap方法连接,插入噬菌体载体pComb3x构建成库容量为4.6x108的单链抗体噬菌体库.以纯化UreB为靶标筛选获得与UreB发生反应最强的克隆ScFvl,通过免疫印迹的方法证明,ScFvl仅与UreB和Hp菌株反应,不与非Hp菌株反应.结论 人源化抗Hp噬菌体抗体库的建立为重组人抗Hp slgA分子的构建表达奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	安黎云		17	124	5.0	10.0
2	王宪灵		16	74	3.0	8.0
3	王缚鲲		28	155	5.0	12.0
4	贾克然		11	14	3.0	3.0