一种新型肝癌免疫毒素的表达、纯化及初步鉴定

• 作者: 杜冰 王媛媛 钱旻 韩红辉
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 医学
• 关键词: 肝癌特异性结合肽 蜂毒肽 免疫毒素 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 110-115
• 页数: 6页
• 分类号: R392
• 字数: 5099字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-2478.2008.02.006

摘要

从噬菌体随机肽库中筛选获得了与肝癌细胞特异性结合的12-肽 A54,将其与蜂毒肽(melittin,Mel)编码基因连接后,插入质粒载体pET-32a(+)中,构建成A54-Mel与硫氧还蛋白(thioredoxin,Trx)及六聚组氨酸(6×His)的融合表达载体pET32-A54-Mel.将重组质粒转化E.coli BL21(DE3)表达后,获得可溶性表达产物,经Western blot鉴定,表达产物能与蜂毒肽特异性抗体反应.表达菌经超声裂解后,上清液用Ni+离子亲和层析法纯化得到了融合蛋白(Trx-A54-Mel),经肠激酶裂解、再次Ni+离子亲和层析后得到纯度大于95%的肝癌特异性免疫毒素A54-Mel.经细胞ELISA和四氮唑盐(MTT)法检测,发现A54-Mel在体外具有一定的肿瘤细胞特异性靶向及杀伤活性,为新型免疫毒素在肝癌靶向治疗中的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钱旻	华东师范大学生命科学学院	65	376	12.0	16.0
2	杜冰	华东师范大学生命科学学院	27	115	6.0	10.0
3	王媛媛	华东师范大学生命科学学院	11	111	5.0	10.0
4	韩红辉	华东师范大学生命科学学院	8	24	2.0	4.0