高纯度白介素-3与假单胞菌外毒素融合蛋白的表达、纯化及质谱鉴定

• 作者: 娄世锋 廖乐乐 曾翰庆 白凤霞
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 重组免疫毒素 IL3-PE38KDEL 纯化复性 质谱鉴定
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 138-141,151
• 分类号: Q1
• 字数: 3273字
• 语种: 中文

摘要

旨在利用简单的表达纯化工艺,获得纯度较高、有活性的重组免疫毒素IL3-PE38KDEL并对其物理学及免疫学性质进行鉴定.利用PQE30-IL3-PE38KDEL/SG12009工程菌表达重组免疫毒素IL3-PE38KDEL,在提取包涵体后经一步强阳离子柱层析得到纯度较高的免疫毒素复性纯化产物,用Westen blotting、质谱、氨基测序等先进技术对产物鉴定. 结果显示,发酵后目的蛋白表达量占总菌体的17.56%,经强阳离子柱层析纯化复性后的目的蛋白纯度达到90%以上,Western blotting、质谱、氨基测序结果均表明,纯化产物分子量为54.9 kD且具有相应的免疫学活性,序列与预期序列完全一致.纯化复性方法对重组免疫毒素IL3-PE38KDEL的生物性质及纯度有较大影响,因此选择一种适当的纯化复性方法至关重要.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	娄世锋	重庆医科大学附属第二医院血液内科	91	274	8.0	12.0
2	曾翰庆	重庆医科大学检验系重点实验室	4	6	2.0	2.0
3	白凤霞	重庆医科大学检验系重点实验室	10	13	2.0	3.0
4	廖乐乐	重庆医科大学附属第二医院血液内科	2	3	1.0	1.0