抗菌抗癌肽CM4N在大肠杆菌中的融合表达与活性鉴定

• 作者: 张双全 张杰 焦波 秋雯 陈玉清
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 抗菌肽CM4 原核表达 intein融合 活性
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 161-165
• 页数: 5页
• 分类号: Q516
• 字数: 3880字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8915.2008.03.002

摘要

为探讨内含肽intein在抗菌肽表达与纯化中的应用,采用递归PCR法合成CM4末端添加Asn的基因CM4N,克隆至E.coli表达载体pTYB11中,构建了与intein的C端融合的表达载体pTYYB11-CM4N.重组质粒转化至E.coli BL21(DE3)中进行IPTG诱导表达,融合蛋白intein-CM4N主要以可溶形式存在于胞内.利用载体中intein中的chitin结合域,将融合蛋白通过chitin亲和层析一步纯化,经DTT诱导intein的自我切割活性,实现CM4N在亲和柱上的切割与分离,透析冻干后得到了纯度95%以上的重组CM4N.活性检测结果显示,重组CM4N具有抗大肠杆菌、沙门氏菌和K562肿瘤细胞的活性.研究认为,内含肽在抗菌肽的基因工程中可能具有重要的应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张双全	南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室	75	1091	20.0	30.0
2	张杰	南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室	59	551	13.0	23.0
3	陈玉清	南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室	14	163	8.0	12.0
4	秋雯	南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室	1	5	1.0	1.0
5	焦波	南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室	1	5	1.0	1.0