在毕赤酵母中表达人溶菌酶蛋白的研究

• 作者: 唐克轩 胡乔 赵凌侠
• 来源期刊: 上海交通大学学报（农业科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 人溶菌酶 毕赤酵母 生物活性
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 页码范围: 233-236,241
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3363字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-9964.2008.03.012

摘要

将化学合成的人溶茵酶基因舰hLYZ(444 bp)构建到毕赤酵母分泌型表达载体pPICZ上;载体质粒用Sac I线性化后电击法转化毕赤酵母菌株GS115.在舍Zeocin的抗性培养基筛选后PCR鉴定获得了9株重组菌株.重组菌株经甲醇诱导后取表达上清液进行SDS-PAGE电泳和Western blot分析.结果显示,重组hLYZ在毕赤酵母中成功表达,在诱导60 h时表达量最高.用镍亲和层析柱纯化重组hLYZ,用Bradford法测得其含量约为324 mg·L-1.比浊法活性测定结果显示所表达的重组人溶茵酶活性达到4473 U.mL-1.本研究利用毕赤酵母分泌型表达载体成功表达了重组人溶菌酶,并探索了简单有效的纯化和活性测定方法,为利用毕赤酵母系统规模化生产重组人溶菌酶奠定了技术基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵凌侠	上海交通大学农业与生物学院	17	113	6.0	10.0
2	唐克轩	上海交通大学农业与生物学院	38	521	12.0	22.0
3	胡乔	上海交通大学农业与生物学院	1	8	1.0	1.0