慢病毒GFP质粒的构建及脂质体介导鸡胚细胞中瞬时表达动力学初步研究

• 作者: 李建国 范睿 蔡亚非
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 慢病毒载体 GFP TOPO克隆 Hela细胞 鸡胚X期细胞
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 593-598
• 页数: 6页
• 分类号: Q782
• 字数: 3915字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2008.05.005

摘要

GFP(green fluorescent protein)是一种用于检测细胞的基因表达和蛋白定位的报告基因,pLenti6/V5-D-TOPO是高效的慢病毒类表达载体.实验利用PCR(polymerase chain reaction)从质粒pEGFP-N1中扩增了EGFP 基因片段,再利用高效、快速、定向的TOPO克隆法将扩增片段克隆到pLenti6/ V5-D-TOPO载体中,构建了既能高效转染细胞又能方便观察蛋白表达情况的pLEGFP重组载体.通过PCR法鉴定及瞬时转染,结果显示,GFP基因正确地插入载体中,并能够在Hela细胞及鸡胚X期细胞中瞬时表达,但重组和对照质粒瞬时转染效果存在明显差异.通过该研究证实分子量大小、质粒和脂质体比例是影响转染的关键因素,也为转基因的研究提供了一种方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡亚非	安徽师范大学安徽省重要生物资源保护与利用重点实验室	33	304	9.0	16.0
5	李建国	安徽师范大学安徽省重要生物资源保护与利用重点实验室	7	5	1.0	1.0
9	范睿	安徽师范大学安徽省重要生物资源保护与利用重点实验室	3	7	2.0	2.0