分枝杆菌穿梭表达质粒pJHSP70的构建及鉴定

• 作者: 刘少宁 向廷秀 吕琳 曹红丹 王丕龙 王丽娟
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 结核分枝杆菌 热休克蛋白70 启动子 基因表达
• 年，卷（期）: 2008,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 890-893
• 页数: 4页
• 分类号: Q75|Q781|Q939.131
• 字数: 4022字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2008.10.002

摘要

目的 用结核分枝杆菌热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)启动子改建分枝杆菌穿梭质粒pJEM11为分枝杆菌穿梭表达质粒pJHSP70,并对其功能进行鉴定.方法 以卡介苗(BCG)基因组DNA为模板,利用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增HSP70启动子,克隆至pMD18-T载体,经鉴定后,再定向克隆入pJEM11的Apa Ⅰ位点与SnaB Ⅰ位点之间,构建pJHSP70载体,并对载体进行PCR及酶切鉴定,然后再将幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)尿素酶B亚单位(urease B subunit,UreB)基因克隆入pJHSP70载体,评价其在耻垢分枝杆菌(Mycobacteria smegmatis,M. smegmatis)mc2 155中的表达情况.结果 从BCG基因组中扩增出160 bp的基因片段,所构建的穿梭质粒经酶切和PCR鉴定与预期结果一致.测序结果证实插入片段正确,UreB基因在M. smegmatis中成功表达.结论 成功改建穿梭质粒pJEM11为穿梭表达质粒pJHSP70.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王丕龙	重庆医科大学附属第一医院消化内科	151	971	16.0	24.0
2	向廷秀	重庆医科大学附属第一医院实验研究中心	53	224	7.0	12.0
3	吕琳	重庆医科大学附属第一医院消化内科	31	178	8.0	12.0
4	曹红丹	重庆医科大学附属第一医院消化内科	5	12	2.0	3.0
5	刘少宁	重庆医科大学附属第一医院消化内科	6	14	2.0	3.0
6	王丽娟	重庆医科大学附属第一医院消化内科	12	54	4.0	7.0