化疗诱导Egr-1启动子调控造血因子基因表达的实验研究

• 作者: 周进明 孙君重 李秋文 杜楠 裴雪涛 赵晖
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Egr-1蛋白 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 造血干细胞 活性氧
• 年，卷（期）: 2008,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1447-1450
• 页数: 4页
• 分类号: R394.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2008.12.016

摘要

目的 探索化疗药物诱导Egr-1启动子调控GM-CSF基因表达对化疗后造血损伤的恢复作用.方法 将GM-CSF和EGFP双顺反子基因重组于携带Egr-1调控元件的pCIneo真核表达载体,构建Egr-EG载体,通过脂质体介导转染骨髓基质细胞HF-CL,即获得HFCL/EG细胞.MITT法测定顺铂(DDP)、氟尿嘧啶(5-FU)、吉西他滨(GEM)和紫杉醇(PTX)对HFCL和HFCL/EG细胞存活率的影响,并计算各药物对细胞的IC50值.倒置荧光显微镜和流式细胞仪检测化疗药物诱导后绿色荧光蛋白(EGFP)表达阳性的HFCL/EG细胞百分率.ELISA法检测活性氧抑制剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对化疗药物诱导的Fgr-1启动子调控的下游GM-CSF基因表达的影响.观察化疗诱导后HFCL/EG上清对粒-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)的影响.结果 成功构建了Egr-Eg载体,其转染细胞HFCL/EG细胞对DDP、5-FU、GEM和PTX有不同的敏感性,且药物对HFCL/EG细胞IC50值均较HFCL组明显增加(P＜0.05).流式细胞仪检测显示DDP、5-FU、GEM和PTX均可以诱导调控Egr-1启动子调控的EGFP表达,HFCL/EG+DDP组、HFCL/EG+5-FU组、HFCL/EG+GEM组、HECL/EG+PTX组绿色荧光阳性的细胞百分率分别为35.06%±0.61%、65.12%±1.10%、44.47%±0.71%、37.56%±0.63%,与HFCL/EG组(10.02%±0.21%)相比明显增加(P＜0.05).化疗药物处理后,HFCL/EG细胞培养上清液中,GM-CSF含量和CFU-GM形成数量较未化疗组明显增高(P＜0.05);但加入活性氧抑制剂N-乙酰半胱氨酸后,培养上清中GM-CSF含量明显减少(P＜0.05).结论 化疗药物诱导的Egr-1启动子调控下游基因表达与活性氧相关,且Egr-1启动子调控的造血生长因子基因表达可能对化疗后的造血损伤具有一定的保护作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	裴雪涛		124	630	13.0	20.0
2	孙君重	解放军总医院第一附属医院肿瘤科	28	82	6.0	8.0
3	杜楠	解放军总医院第一附属医院肿瘤科	45	188	8.0	11.0
4	周进明	解放军总医院第一附属医院肿瘤科	6	1	1.0	1.0
5	李秋文	解放军总医院第一附属医院肿瘤科	21	127	5.0	11.0
6	赵晖	解放军总医院第一附属医院肿瘤科	11	37	3.0	6.0