Tet-off系统对小鼠骨髓基质细胞中人IFN-γ基因表达的调控作用

• 作者: 吕跃 秦鑫添 耿其荣 谭银多 陈晓勤
• 来源期刊: 癌症
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓基质细胞 Tet-off系统 IFN-γ基因 调控 小鼠
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 46-51
• 页数: 6页
• 分类号: R733.72
• 字数: 5620字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-467X.2008.01.009

摘要

背景与目的:本实验室已成功构建了质粒pTre-IFN-γ,并证实四环素基因调控系统(Tet-off system)能在体外调控人γ-干扰素(interferon-gamma,IFN-γ)基因在小鼠骨髓基质细胞(marrow stromal cells,MSCs)中的表达.本实验进一步研究Tet-off系统体外调控的可逆性,以及其对小鼠MSCs中人IFN-γ基因表达的调控作用.方法:脂质体介导pTet-off和pTre-IFN-γ质粒共转染小鼠MSCs.用ELISA法检测MSCs培养液中人IFN-γ蛋白的分泌量.把共转染后的MSCs回输给BALB/c裸小鼠,用实时荧光定量RT-PCR方法检测各组BALB/c裸小鼠脾组织中的IFN-γmRNA含量.结果:用ELISA法可检测到共转染后的MSCs培养液中有IFN-γ蛋白分泌,分泌高峰在前72 h内;共转染后84 h加入含300 ng/mL盐酸四环素的培养液培养12 h,每1×107个细胞的分泌量为(67.11±22.14)pg,无四环素处理组为(319.96±29.04)pg,两组相比差异有统计学意义(P＜0.001);去除四环素后,IFN-γ蛋白分泌显著增加(P=0.032).用实时荧光定量RT-PCR可检测到回输共转染MSCs的各组BALB/c裸小鼠脾组织中均有IFN-γmRNA转录,不用四环素处理组最高,达(1.5±0.7)×105copy·(100mg)-1,定期四环素处理组为(6.9±5.3)×102 copy·(100mg)-1(P＜0.001),接受1次四环素处理组表达量介于前两者之间,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论:Tet-off系统在体外和体内都可以迅速、有效地调控人IFN-γ基因在小鼠MSCs中的表达,而且调控是可逆的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈晓勤		15	84	5.0	8.0
3	吕跃		8	63	5.0	7.0
5	谭银多		4	17	3.0	4.0
7	耿其荣		4	19	3.0	4.0
12	秦鑫添		2	33	2.0	2.0