红系分化相关基因相互作用蛋白质的分离与鉴定

• 作者: 于淼 徐诚望 李长燕 杨晓明 王治东 詹轶群 许望翔
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 单克隆抗体 免疫共沉淀 质谱 相互作用蛋白质
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 309-313
• 页数: 5页
• 分类号: Q71
• 字数: 3731字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2008.04.007

摘要

目的 制备红系分化相关基因(erythroid differentiation-associated gene,EDAG)蛋白的单克隆抗体,利用免疫沉淀联合质谱技术对EDAG相互作用蛋白质进行分离与鉴定.方法 构建EDAG原核表达载体,通过诱导、表达、纯化获得EDAG融合蛋白,杂交瘤技术建立分泌EDAG单克隆抗体的杂交瘤细胞株,利用Western印迹筛选阳性杂交瘤细胞,免疫小鼠得腹水,最后用免疫共沉淀与质谱联合鉴定EDAG相互作用蛋白.结果 纯化获得EDAG重组蛋白,筛选出4株分泌EDAG单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并制备了腹水.该抗体均可用于内源EDAG蛋白的检测,其中两种抗体可用于免疫共沉淀实验,运用质谱技术筛选获得EDAG候选相互作用蛋白.结论 利用EDAG单克隆抗体,筛选到EDAG候选相互作用蛋白质13种,涉及细胞增殖及转录等过程,为EDAG的功能研究及其分子机制的阐明提供了新的线索.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨晓明	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	88	536	11.0	19.0
2	詹轶群	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	36	155	5.0	11.0
3	许望翔	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	20	154	6.0	12.0
4	李长燕	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	23	130	5.0	11.0
5	王治东	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	25	87	6.0	8.0
6	于淼	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	11	21	2.0	4.0
7	徐诚望	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	3	12	2.0	3.0