人甲型流感病毒H3N2亚型中和表位串联基因原核表达载体的构建

• 作者: 孙杰 戚扬 朱雷 李金波 王强 程云 苏海滨 迟淑平
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人甲型流感病毒 H3N2亚型 中和表位 串联基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 178-180,189
• 页数: 4页
• 分类号: Q78|R373.1+3
• 字数: 2766字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2008.03.003

摘要

目的 构建人甲型流感病毒H3N2亚型中和表位串联基因原核表达载体,并在大肠杆菌中表达目的蛋白.方法 合成人甲型流感病毒H3N2亚型中和表位的串联基因,克隆人pET-28a(+)载体中,构建重组表达载体pET-28a-H3,经酶切鉴定和DNA序列分析后,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,并进行ELISA和Western blot鉴定.结果 重组载体pET-28a-H3酶切片段大小和DNA序列分析与预期结果一致.表达的目的蛋白相对分子质量约9 400,与相应的多克隆抗体反应性良好.结论 已成功构建人甲型流感病毒H3N2亚型中和表位串联基因原核表达载体pEW-28a-H3,并表达了目的 蛋白,为制备单克隆和多克隆抗体奠定了基础.