中华蜜蜂气味结合蛋白ASP2 cDNA的克隆及原核表达

• 作者: 李红亮 程家安 聂文敏 高其康
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 中华蜜蜂 工蜂触角 气味结合蛋白 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 933-938
• 页数: 6页
• 分类号: S8
• 字数: 5504字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2008.03.041

摘要

[目的]克隆、分析和原核表达编码中华蜜蜂气味结合蛋白ASP2的cDNA.[方法]以13个不同日龄中华蜜蜂工蜂触角为材料,通过RT-PCR技术以获得编码中华蜜蜂Apis cerana cerana气味结合蛋白ASP2基因成熟蛋白开放阅读框序列,并在pET-30a(+)/BL21(DE3)系统中进行原核表达.[结果]克隆了命名为Acer-ASP2(GenBank登录号:DQ449667)的中华蜜蜂气味结合蛋白ASP2基因,该序列全长429 bp,编码142个氨基酸残基,预测分子量和等电点分别为15.7 kD和4.36.预测蛋白具有昆虫气味结合蛋白典型的6个保守的半胱氨酸残基的特征,进一步分析表明Acer-ASP2极有可能属于GOBP家族.构建的原核表达载体pET/Acer-ASP2,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功地表达出一个分子量约为21kD的融合蛋白,融合蛋白大部分以包涵体的形式存在于菌体沉淀中(约59.7%),经洗涤和尿素梯度溶解对包涵体进行了纯化,经凝胶光密度扫描分析,约占最终产物的81.2%左右.[结论]克隆、分析和表达了一个新的编码中华蜜蜂气味结合蛋白ASP2 cDNA序列,为进一步研究其分子结构和功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	程家安	浙江大学昆虫科学研究所	191	5151	38.0	60.0
2	李红亮	中国计量学院生命科学学院	22	220	9.0	14.0
6	高其康	浙江大学昆虫科学研究所	41	425	12.0	19.0
7	聂文敏	浙江大学昆虫科学研究所	1	34	1.0	1.0