枯草杆菌ylyA基因的绿色荧光蛋白标记

• 作者: Peter J. Lewis 霍乃蕊
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 枯草杆菌 YlyA蛋白 荧光标记
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 829-833
• 页数: 5页
• 分类号: Q933
• 字数: 3249字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2008.06.021

摘要

[目的]本研究对枯草杆菌ylyA基因进行荧光标记以便对其产物YlyA在菌体中的位置进行初步观察.[方法]以不同菌株基因组DNA为模板,对ylyA基因进行PCR扩增和序列分析;重新设计引物扩增全长的ylyA并将其克隆到载体pSG1729中,形成gfpmut1-ylyA融合而构建重组载体pNG426;将pNG426转化枯草杆菌168菌株,双交换使gfpmut1-ylyA插入染色体的amyE位点,用碘染色法和菌落PCR对阳性转化子BS363进行鉴定.NA固体培养基上生长的BS363经0.5%木糖诱导表达后,利用表面荧光显微镜技术进行观察.[结果]通过对多个PCR产物的序列分析确定了ylyA基因的正确序列以及正确的翻译起始位点;成功将重组载体pNG426转化枯草杆菌得到了BS363菌株;荧光检测结果表明GFP标记的YlyA分布于菌体的外周,在位置上靠近细胞膜并与之平行排列.[结论]生长缓慢的BS363菌体,在0.5%木糖诱导下产生的荧光标记YlyA蛋白分布在细胞外周,可能在膜生物学中发挥作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	霍乃蕊	山西农业大学食品科学与工程学院	86	578	12.0	21.0