PFP、GrB真核共表达载体的构建及表达分析

• 作者: 夏良平 李秀英 赖延东
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 穿孔素 颗粒酶B 共表达 间接免疫荧光
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 492-495
• 页数: 4页
• 分类号: Q812
• 字数: 3358字
• 语种: 中文

摘要

目的:体外扩增出PFP、GrB基因的全片段并构建共表达重组体pVAX1-PIG(即 pVAX1-PFP-IRES-GrB),分析其在人喉癌细胞Hep-2中的表达情况.方法:利用RT-PCR的方法从人的喉癌组织浸润淋巴细胞中扩增全长PFP、GrB的cDNA片段并构建共表达重组体pVAX1-PIG.利用脂质体LipofectamineTM2000将重组真核表达载体pVAX1-PIG转染入人的Hep-2细胞株中,采用RT-PCR、间接免疫荧光法分析其在人Hep-2中的表达情况.结果:经双酶切、测序法证实已成功扩增PFP、GrB基因的全长cDNA,并构建共表达重组体pVAX1-PIG,在荧光显微镜下可见已转染pVAX1-PIG的人Hep-2细胞的胞浆发出苹果绿色荧光.结论:成功扩增PFP、GrB全片段、构建共表达重组体pVAX1-PIG,并在人Hep-2细胞中检测到PFP、GrB蛋白的表达,穿孔素(PFP)/颗粒酶B共同表达能够介导细胞的凋亡,为其在喉癌治疗中的应用研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李秀英	暨南大学药学院基因组药物研究所	29	50	5.0	5.0
2	夏良平	中山大学肿瘤防治中心华南肿瘤学国家重点实验室	25	125	6.0	10.0
3	赖延东	暨南大学药学院基因组药物研究所	1	0	0.0	0.0