人VIGILIN的shRNA真核表达质粒的构建及其对肝癌细胞周期影响的初探

• 作者: 杨文理 葛亚俊 覃扬 谢晓砚 魏玲
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 高密度脂蛋白结合蛋白 RNA干扰 细胞周期
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 527-530,539
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3130字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2008.04.002

摘要

目的 构建靶向人高密度脂蛋白结合蛋白(VIGILIN)的shRNA真核表达载体,并初步探索VIGILIN与人肝癌细胞系HepG2细胞周期是否有关联.方法 构建人VIGILIN的shRNA重组质粒,并将重组质粒pSIREN-VIG转染HepG2细胞,采用RT-PCR和Western-blot检测HepG2细胞VIGILIN mRNA和蛋白的表达,并用流式细胞术检测细胞周期是否有所改变.结果 ①HepG2细胞转染pSIREN-VIG后,VIGILIN的表达被特异、有效地抑制.转染48 h后,VIGILIN的表达从mRNA和蛋白的水平都有明显的减少;②VIGILIN表达抑制后,G2/M期细胞所占比例增加:相对于三个对照组(未转染组2.4%,脂质体转染组4.9%和转染pSIREN-GFP组6.5%),实验组(转染pSIREN-VIG组)G2/M期细胞增加到9.4%.结论 我们成功的构建了能特异、有效的抑制人VIGILIN表达的shRNA表达质粒,人VIGILIN能够影响到细胞周期的正常运行,导致G2/M期阻滞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	覃扬	四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室	27	139	7.0	10.0
2	杨文理	四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室	7	27	3.0	5.0
3	葛亚俊	四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室	4	15	2.0	3.0
4	魏玲	四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室	19	69	3.0	7.0
5	谢晓砚	四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室	4	9	2.0	2.0