甲羟戊酸激酶基因真核及shRNA表达载体构建及其对BxPC-3细胞周期蛋白表达的影响

• 作者: 张胜权 栾康 王芳 罗欣 金锐
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 甲羟戊酸激酶 基因重组 寡核苷酸 细胞周期蛋白 BxPC-3 shRNA
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 22-26
• 页数: 5页
• 分类号: R349.83
• 字数: 4090字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建甲羟戊酸激酶( MVK)基因真核及shRNA表达载体并转染至BxPC-3细胞中,观察其对细胞周期蛋白的影响.方法 从BxPC-3细胞中提取总RNA, 逆转录PCR ( RT-PCR)法获得目的基因 MVK 以及通过化学合成 MVK (751~779)和 MVK(1 089~1 117)位点寡核苷酸片段,构建真核表达及shRNA表达载体并转染至BxPC-3细胞,筛选稳定表达细胞系.Western blot法分析转染后对BxPC-3细胞周期蛋白的影响.结果 成功获得MVK基因真核表达( pcD-NA3. 1-mvk)及两个针对 MVK shRNA 表达载体( piLenti-RNAi-shRNA1/2). 通过抗生素筛选及Western blot分析获得了稳定的MVK过表达及低表达细胞株. Western blot分析显示:过表达MVK的细胞株及MVK knockdown的细胞株中细胞周期蛋白Cyclin B1、Cyclin E表达量与正常及对照细胞相比均显著降低. 结论 MVK过表达及低表达均抑制Bx-PC-3细胞周期蛋白Cyclin B1、Cyclin E的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗欣	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	41	130	6.0	8.0
2	张胜权	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	64	295	8.0	14.0
3	王芳	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	64	274	8.0	14.0
4	金锐	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	5	8	2.0	2.0
5	栾康	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	2	4	1.0	2.0