大肠杆菌表达人IL-21融合蛋白的纯化和抗原性分析

• 作者: 付强 侯伟 王斌 钱冬萌 闫志勇
• 来源期刊: 青岛大学医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 白细胞介素21 基因表达 免疫印迹法 重组融合蛋白质类
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 41-43
• 页数: 3页
• 分类号: R34-33
• 字数: 2451字
• 语种: 中文

摘要

目的 在大肠杆菌中表达人IL-21编码基因,并进行蛋白纯化和抗原性分析.方法 以经PHA刺激的人扁桃体细胞cDNA 文库为模板,经PCR获得IL-21全基因片段.测序确认后,分别设计含BamHⅠ和SalⅠ酶切位点的引物,经PCR获得IL-21成熟肽的编码基因.将此IL-21基因插入表达载体pGEX-4T-2,重组克隆经酶切与测序确认后转化大肠杆菌DH5α,进行IPTG诱导表达.经琼脂糖珠结合的纯化方法所得产物用Western Blotting作抗原性分析.结果 SDS-PAGE显示经IPTG诱导后的大肠杆菌DH5α表达与理论相符的条带,并获得了与理论值相符的纯化条带,在进一步的Western Blotting分析中发现表达的蛋白能与IL-2的单抗产生结合反应.结论 人IL-21编码基因克隆载体在大肠杆菌中成功表达,同时建立了该蛋白的琼脂糖珠纯化方法,通过免疫印迹实验揭示了原核表达的IL-21蛋白与IL-2之间结构的相似性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	付强	滨州医学院烟台校区免疫学教研室	18	62	5.0	7.0
2	王斌	滨州医学院烟台校区免疫学教研室	4	0	0.0	0.0
3	钱冬萌	滨州医学院烟台校区免疫学教研室	2	0	0.0	0.0
4	闫志勇	滨州医学院烟台校区免疫学教研室	2	0	0.0	0.0
5	侯伟	滨州医学院烟台校区免疫学教研室	2	0	0.0	0.0