含LoxP位点和EGFP的鸭瘟病毒TK基因缺失转移载体的构建

• 作者: 刘磊 孙海亮 曹瑞兵 李娟 潘光炎 潘华奇 袁立科 魏凡华
• 来源期刊: 甘肃农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭瘟病毒 EGFP Cre/LoxP TK基因 转移载体
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 动物科学·动物医学
• 页码范围: 8-12
• 页数: 5页
• 分类号: S858.32|Q782
• 字数: 3419字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-4315.2008.02.002

摘要

提取鸭瘟病毒(DPV)疫苗株基因组DNA为PCR扩增模板.并根据GenBank已发表的DPV UL区UL24、UL23、UL22基因序列.选择保守序列设计了两对引物.分别扩增出位于UL23(TK)两侧的可用于同源重组的左臂片段(L)和右臂片段(R).L包括部分UL24、部分TK,R包括部分TK及部分UL22,L和R的拼接片段中TK基因内部缺失468个核苷酸.将L片段和R片段克隆于pBluescript M13-载体上.获得了pSKLR;再将含2个LoxP位点的表达绿色荧光蛋白的基因表达盒插人pSKLR的L片段和R片段之间构成转移载体pSKLR-EGEP-LoxP.大量提取pSKLR-EGEP-LoxP质粒.用脂质体转染鸭胚成纤维细胞.24 h后蛋白被正确表达.表明含LoxP位点的表达EGFP的鸭瘟病毒TK基因缺失的重组转移载体被成功构建.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹瑞兵	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	71	897	19.0	28.0
2	刘磊	甘肃农业大学动物医学院	49	369	11.0	17.0
3	魏凡华	宁夏大学农学院动物科学系	14	50	3.0	7.0
4	潘华奇	甘肃农业大学动物医学院	3	21	2.0	3.0
5	李娟	甘肃农业大学动物医学院	4	16	2.0	4.0
6	孙海亮	甘肃农业大学动物医学院	2	10	1.0	2.0
7	袁立科	甘肃农业大学动物医学院	1	9	1.0	1.0