Ⅰ型流感病毒核蛋白(NP)基因在大肠杆菌中的表达与鉴定

• 作者: 尤敏 崔尚金 邹玉红
• 来源期刊: 中国医学装备
• 学科: 医学
• 关键词: 流感病毒 核蛋白 原核表达 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 临床应用
• 页码范围: 36-40
• 页数: 5页
• 分类号: R516
• 字数: 4032字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-8270.2008.08.014

摘要

目的:以Ⅰ型流感病毒RNA为模板扩增NP全基因cDNA,并在大肠杆菌中进行表达与鉴定.方法:提取流感病毒RNA,以RT-PCR法扩增编码NP基因cDNA.将扩增所得NP基因克隆于pMD18-T载体,然后定向亚克隆NP基因于原核表达载体pET-28a的多克隆位点中,经酶切鉴定后,将含有NP基因的重组质粒命名为pET-NP.用pET-NP转化受体菌BL21,在大肠杆菌BL21中表达,用诱导剂IPTG以不同浓度进行诱导,并在不同诱导时间收集样品,用SDS-PAGE和Western blot检测表达产物.结果:经SDS-PAGE电泳分析证实NP基因获得了表达,并在终浓度为1 mM的IPTG诱导下,6 h其表达量达到高峰,经Western-blot分析证实表达的重组核蛋白具有免疫反应活性,大小约为60 kd.结论:流感病毒核蛋白基因编码区基因获得成功克隆和构建,为流感病毒诊断试剂及单抗的研制工作提供了基础材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	尤敏		23	109	5.0	10.0
2	邹玉红		4	8	2.0	2.0
3	崔尚金		8	26	3.0	5.0