融合蛋白hJagged1ext-Fc毕赤酵母表达载体的构建及表达

• 作者: 伍艳兰 何飞 康志杰 张丽 徐恒 李国辉 梁英民 牛晓丽 韩骅 马长升 黄斯勇
• 来源期刊: 中国实验血液学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Jaggedl hJagged1ext-Fc 造血干/祖细胞 Notch 融合蛋白 毕赤酵母
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 免疫血液学与分子血液学
• 页码范围: 910-914
• 页数: 5页
• 分类号: Q789|Q782|R331.2
• 字数: 3324字
• 语种: 中文

摘要

本研究旨在构建人IgG1 Fc蛋白及融合蛋白hJagged1ext-Fc,并在毕赤酵母GS115中表达.用RT-PCR法从人骨髓细胞中扩增hJagged1基因的胞外段.在测序正确后,将hJagged1基因的胞外段插入构建好的PIC-Fc载体,得到PIC-hJagged1ext-Fc.用MD平板筛选重组子,G418法筛选高拷贝转化子,经甲醇诱导表达后,采用SDSPAGE分析表达蛋白.结果表明:hJagged1基因的胞外段被有效地扩增.序列分析显示所构建的舍phJagged1ext-Fc融合基因的质粒与设计相同,人IgG1 Fc蛋白及融合蛋白hJagged1ext-Fc得到正确表达.结论:成功地构建了hJagged1ext-Fc融合基因的毕赤酵母表达载体,并在毕赤酵母中正确表达,为进一步研究Jagged1在造血干/祖细胞的体外扩增奠定了基础.