人胰高糖素样肽-1及其突变体在大肠杆菌BL21中的表达与生物活性研究

• 作者: 张立操 张莲芬 窦文芳 金坚 陈蕴 雷楗勇
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 医学
• 关键词: 人胰高糖素样肽-1 突变体 表达 生物活性
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 139-143
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3767字
• 语种: 中文

摘要

以人胰高糖素样肽-1(human ghcagom-like peptide-1,GLP-1))为研究对象,以克隆载体pPblu2SKP/(GLP-1A2G) 2基因为模板,利用PCR扩增获得GLP-1与其突变体GLP-1A2G的编码基因,并将其插入原核表达质柱pGEX-4T-1中,利用氟化钙法将其转入表达宿主大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中诱导表达,经IPTG诱导后,收集菌体.菌体经超声破碎后,裂解液用GST亲和层析纯化得到融合蛋白,经凝血酶酶解,用Superdex G-75凝胶层析,得到GLP-1及其突变体GLP-1A2G的样品,经SDS-PAGE电泳测定,样品纯度>90%.小鼠糖耐量试验表明,相对于空白对照组而言,GLP-1及其突变体GLP-1A2G可以明显地控制血糖的水平,两者的生物活性并无明显差异.由于突变体GLP-1A2G较GLP-1可以更加有效的抵制DPPN的降解,提示突变体GLP-1<A2G>较GLP-1在白蛋白融合或PEG修饰等方面具有更大的优势.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张莲芬	江南大学医药学院制药细胞与分子药理实验室	32	395	12.0	19.0
2	金坚	江南大学医药学院制药细胞与分子药理实验室	196	1025	16.0	22.0
3	窦文芳	江南大学医药学院制药细胞与分子药理实验室	55	278	10.0	13.0
4	陈蕴	江南大学医药学院制药细胞与分子药理实验室	85	685	13.0	23.0
5	雷楗勇	江南大学医药学院制药细胞与分子药理实验室	19	86	5.0	8.0
6	张立操	江南大学医药学院制药细胞与分子药理实验室	1	5	1.0	1.0