德氏乳杆菌保加利亚亚种β-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌中的非融合表达

• 作者: 余倩 刘衡川 张朝武 汪川 裴晓方
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: β-半乳糖苷酶基因 非融合 表达重组 德氏乳杆菌保加利亚亚种
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 544-546
• 页数: 3页
• 分类号: Q78|R151
• 字数: 2527字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2008.04.006

摘要

目的 在大肠杆菌中非融合表达德氏乳杆菌保加利亚亚种β-半乳糖苷酶,为构建能高效表达β-半乳糖苷酶的食品级益生菌株奠定基础.方法 选择德氏乳杆菌保加利亚亚种(1.1480和wch9901)β-半乳糖苷酶基因(lacZ)起始密码ATG上游-18 bp到ATG下游1 bp的一段包含SD位点和ATGA位点的序列为上游引物,PCR扩增lacZ,插入表达质粒pMG36e构建重组表达质粒.转化大肠杆菌,筛选阳性克隆,提取重组质粒进行酶切鉴定和测序,并测定转化菌β-半乳糖苷酶活性.结果 重组质粒酶切鉴定合格;其中插入的外源片段序列与德氏乳杆菌保加利亚亚种lacZ标准序列符合率达99%以上;携带重组质粒pMG36e-lacZ 1.1480的大肠杆菌DH5a酶活性为3.074 U/mL,酶比活性为6.939 U/mg pro;携带重组质粒pMG36e-lacZ wch9901的大肠杆菌DH5a酶活性为4.755 U/mL,酶比活性为8.537 U/mg pro.结论 成功在大肠杆菌中非融合表达了德氏乳杆菌保加利亚亚种β-半乳糖苷酶;本研究选择的SD位点和ATGA位点能在大肠杆菌中有效地引导蛋白的非融合表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘衡川	四川大学华西公共卫生学院医学检验教研室	132	945	15.0	22.0
2	裴晓方	四川大学华西公共卫生学院医学检验教研室	77	537	13.0	17.0
3	张朝武	四川大学华西公共卫生学院医学检验教研室	98	932	14.0	26.0
4	汪川	四川大学华西公共卫生学院医学检验教研室	32	178	9.0	12.0
5	余倩	四川大学华西公共卫生学院医学检验教研室	77	660	14.0	22.0