小鼠精子蛋白Sp17的克隆、表达及其免疫原性研究

• 作者: 史常旭 张巧玉 李晋涛 李玉艳 梁志清
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 小鼠 精子蛋白 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（24）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2281-2284
• 页数: 4页
• 分类号: R321.1|R341|R392.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2008.24.008

摘要

目的 获得鼠精子蛋白Sp17基因,构建重组表达载体并实现其在大肠杆菌中的高效表达,为制备免疫性避孕疫苗奠定基础.方法 提取BALB/c小鼠睾丸组织总RNA,通过RT-PCR扩增Sp17基因全长cDNA序列,并将其克隆至pMD 18-T质粒载体中,再经HindⅢ/ XhoⅠ双酶切将Sp17基因片段亚克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),异丙基-β-硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,采用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、Western blot对表达产物进行初步鉴定,并检测重组蛋白Sp17免疫小鼠后血清特异抗体滴度.结果 获得了小鼠Sp17的全长cDNA,成功构建了重组原核表达载体pET/Sp17,在IPTG的诱导下实现了目的蛋白在大肠杆菌中的高效表达,免疫后小鼠血清中检测到特异性抗体.结论 小鼠精子蛋白Sp17基因序列已被克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,并在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效、正确的表达,重组蛋白Sp17能够诱导产生特异性免疫反应,具有一定程度的免疫原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁志清	第三军医大学西南医院妇产科	272	2095	21.0	30.0
2	李玉艳	第三军医大学西南医院妇产科	85	784	17.0	23.0
3	史常旭	第三军医大学西南医院妇产科	147	999	16.0	22.0
4	李晋涛	第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所	51	189	8.0	11.0
5	张巧玉	第三军医大学西南医院妇产科	22	143	7.0	10.0